电泳缓冲液

电泳缓冲液

测序凝胶加样缓冲液

98%去离子甲酰胺

10mol/L EDTA(pH8.0)

0.025%二甲苯青FF

0.025%溴酚蓝

甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃。

常用的电泳缓冲液

  缓冲液      	          使用液	                               浓贮存液（每升）

Tris-乙酸（TAE）	          1×：0.04mol/L Tris-乙酸	             50×：242g Tris碱

　	                   0.001mol/L EDTA	                   57.1ml冰乙酸

　	　	                                                 100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-磷酸（TPE）	         1×:0.09mol/L Tris-磷酸	             10×:10g Tris碱

　	                  0.002mol/L EDTA	                    15.5ml85%磷酸（1.679g/ml）

　	　	                                                  40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

Tris-硼酸（TBE）a	0.5×0.045mol/L Tris-硼酸	      5×：54g Tris碱

　	                  0.001mol/L EDTA	                     27.5硼酸

　	　	                                                   20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)

碱性缓冲液b	       1×:50mmol/L NaOH	                    1×:5ml 10mol/L NaOH

　	                 1mmol/L EDTA	                    2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)

Tris-甘氨酸c	      1×:25mmol/L Tris                     5×:15.1g Tris

　	                250mmol/L 甘氨酸	                       94g 苷氨酸（电泳级）（pH8.3）

　	                0.1% SDS	                            50ml 10% SDS(电泳级)

说明：

①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。

以片都以1×TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。

进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。

②碱性电泳缓冲液应现用现配。

③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

2×SDS凝胶加样缓冲液：

100mmol/L Tris·HCl(6.8)

200mmol/L二硫苏糖醇（DTT）

4%SDS（电泳级）

0.2%溴酚蓝

20%甘油

不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温，应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。