凝胶加样缓冲液

取自 食品百科全书

6×缓冲液 储存温度

Ⅰ 0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、40%（W/V）蔗糖水溶液 4℃ Ⅱ 0.25溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、15%聚蔗糖(Ficoll400) 室温 Ⅲ 0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、30%甘油水溶液 4℃ Ⅳ 0.25%溴酚蓝、40%(W/V)蔗糖水溶液、碱性加样缓冲液 4℃ Ⅴ 18%聚蔗糖(Ficoll400)、0.15%溴甲酚绿、0.25%二甲苯青FF 4℃

使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三：增大样品密度；以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2.2倍，而与琼脂糖浓度无关。以0.5×TBF作电泳液时，溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同，而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。在琼脂糖浓度为0.5%～1.4%的范围内，这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。

选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。但是，对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料，因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。