凝胶加样缓冲液

取自 食品百科全书

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Ⅱ 0.25溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、15%聚蔗糖(Ficoll400) 室温 Ⅱ 0.25溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、15%聚蔗糖(Ficoll400) 室温
Ⅲ 0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、30%甘油水溶液 4℃ Ⅲ 0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、30%甘油水溶液 4℃
- Ⅳ 0.25%溴酚蓝、40%(W/V)蔗糖水溶液、[[碱性加样缓冲液]] 4℃+ Ⅳ 0.25%溴酚蓝、40%(W/V)蔗糖水溶液、[[碱性加样缓冲液]] 4℃
Ⅴ 18%聚蔗糖(Ficoll400)、0.15%溴甲酚绿、0.25%二甲苯青FF 4℃ Ⅴ 18%聚蔗糖(Ficoll400)、0.15%溴甲酚绿、0.25%二甲苯青FF 4℃

03:09 2007年4月29日的修订版本

                                6×缓冲液                              储存温度
Ⅰ	0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、40%(W/V)蔗糖水溶液                 	4℃
Ⅱ	0.25溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、15%聚蔗糖(Ficoll400)          	室温
Ⅲ	0.25%溴酚蓝、0.25%二甲苯青FF、30%甘油水溶液                    	4℃
Ⅳ	0.25%溴酚蓝、40%(W/V)蔗糖水溶液、碱性加样缓冲液                  4℃
Ⅴ	18%聚蔗糖(Ficoll400)、0.15%溴甲酚绿、0.25%二甲苯青FF	         4℃

使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三:增大样品密度;以确保DNA均匀进入样品孔内;使样品呈现颜色,从而使加样操作更为便利,含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的2.2倍,而与琼脂糖浓度无关。以0.5×TBF作电泳液时,溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。在琼脂糖浓度为0.5%~1.4%的范围内,这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。

选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。但是,对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料,因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。

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