脂质体

取自 食品百科全书

脂质体(liposome)

（一）、生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时，分子的疏水尾部倾向于聚集在一起，避开水相，而亲水头部暴露在水相，形成具有双分子层结构的的封闭囊泡，称为脂质体。 药剂学定义 脂质体 (liposome): 系指将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微型泡囊体。 （二）、脂质体的分类 　　脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同，分为单室脂质体和多室脂质体。 　　小单室脂质体(SUV)：粒径约0.02～0.08um；大单室脂质体 (LUV）为单层大泡囊，粒径在0.1～lum。 　　多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV)，粒径在1～5m之间。 （三）、脂质体的组成与结构 　　脂质体的组成：类脂质（磷脂）及附加剂。 　　1、磷脂类：包括天然磷脂和合成磷脂二类。磷脂的结构特点为一个磷酸基和一个季铵盐基组成的亲水性基团，以及由两个较长的烃基组成的亲脂性基团。 　　天然磷脂以卵磷脂（磷脂酰胆碱，PC）为主，来源于蛋黄和大豆，显中性。 　　合成磷脂主要有DPPP（二棕榈酰磷脂酰胆碱）、DPPE（二棕榈酰磷脂酰乙醇胺）、DSPC（二硬脂酰磷脂酰胆碱）等，其均属氢化磷脂类，具有性质稳定，抗氧化性强，成 　　品稳定等特点，是目前国外首选的辅料。 　　2、胆固醇：胆固醇与磷脂是共同构成细胞膜和脂质体的基础物质。胆固醇具有调节膜流动性的作用，故可称为脂质体“流动性缓冲剂”。 　　（四）、脂质体的制备 　　1、注入法:主要用于制备单室脂质体，少数为多室脂质体，其粒径绝大多数在2m以下。 　　2、薄膜分散法：主要用于制备多室或大单室脂质体，超声后以单室脂质体为主。 　　3、超声波分散法：主要用于制备以单室为主单室脂质体。 　　4、逆相蒸发法：将磷脂溶于有机溶剂，加入含药物的缓冲液，超声使成稳定w/o乳剂，减压除去有机溶剂在旋转器壁上形成薄膜，加入缓冲液使凝胶脱落，制得水性混悬液，通过 　　凝胶色谱法或超速离心法，除去未包入的药物，即得大单室脂质体。 　　5、冷冻干燥法：适合于热敏感的药物。 　　6、重建脂质体：单室或多室型。是目前国外应用最为广泛的制备方法之一。其具有工艺稳定、适合于工业化生产、质量易于控制、产品稳定性好等特点。 　　（五）、脂质体的质量控制与评价 　　1、形态、粒径及其分布 　　采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。如注射给药脂质体的粒径应小于200nm，且分布均匀，呈正态性，跨距宜小。 　　2、包封率和载药量 　　包封率：包封率＝（脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量）×100％ 　　一般采用葡聚糖凝胶、超速离心法、透析法等分离方法将溶液中游离药物和脂质体分离，分别测定，计算包封率。通常要求脂质体的药物包封率达80%以上。 　　载药量：载药量＝[脂质体中药物量/（脂质体中药物＋载体总量）]×100％ 　　载药量的大小直接影响到药物的临床应用剂量，故载药量愈大，愈易满足临床需要。载药量与药物的性质有关，通常亲脂性药物或亲水性药物较易制成脂质体。 　　3、脂质体的稳定性 　　1)、物理稳定性:主要用渗漏率表示。 　　渗漏率＝（放置前介质中药物量－放置后介质中的药量）/制剂中药量x100% 　　胆固醇以加固脂质双分子层膜，降低膜流动，可减小渗漏率。 　　2)、化学稳定性： 　　 (1)磷脂氧化指数：氧化指数＝A233nm=A215nm；一般规定磷脂氧化指数应小于0.2。 　　 (2)磷脂量的测定：基于每个磷脂分子中仅含1个磷原素，采用化学法将样品中磷脂转变为无机磷后测定磷摩尔量（或重量），即可推出磷脂量。 　　4、防止氧化的措施： 　　防止氧化的一般措施有充入氮气，添加抗氧剂-生育酚、金属络合剂等；也可直接采用氢化饱和磷脂。 　　5、脂质体的灭菌： 　　灭菌的一般方法有过滤除菌、无菌操作、－射线照射（60钴15～20kGy）、121℃热压灭菌等。 　　（六）、脂质体的特点 　　1、靶向性和淋巴定向性：肝、脾网状内皮系统的被动靶向性。用于肝寄生虫病、利什曼病等单核-巨噬细胞系统疾病的防治。如肝利什曼原虫药锑酸葡胺脂质体，其肝中浓度比普通 　　制剂提高了200～700倍。 　　2、缓释作用：缓慢释放，延缓肾排泄和代谢，从而延长作用时间。 　　3、降低药物毒性：如两性霉素B脂质体可降低心脏毒性。 　　4、提高稳定性：如胰岛素脂质体、疫苗等可提高主药的稳定性。 　　（七）、脂质体作为药物载体的临床应用 　　1、抗肿瘤药物载体：阿霉素脂质体和顺铂脂质体已在国外上市。 　　2、抗寄生虫药物载体：苯硫咪唑脂质体和阿苯达唑脂质体等。利用脂质体的被动靶向性，提高药物的生物利用度，减少用量，降低毒副作用。 　　3、抗菌药物载体：庆大霉素脂质体和两性霉素B，可减少药物的耐药性，降低心脏毒性。 　　4、激素类药物载体。 　　（八）、给药途径 　　 脂质体的给药途径主要包括(1)静脉注射；(2)肌内和皮下注射；(3)口服给药；(4)眼部给药；(5)肺部给药；(6)经皮给药；(7)鼻腔给药。 　　(九)、脂质体的体内过程 　　脂质体与细胞之间作用的主要形式包括膜间转运（细胞膜的脂质交换）、接触释药、吸附、融合和内吞。 　　（十）、脂质体的发展趋势及存在问题 　　1. 趋势：高效、低毒和靶向。 　　2. 问题：稳定性较差，防止渗漏。 （十一）、新型靶向脂质体 　　1、前体脂质体：将脂质吸附在极细的水溶性载体如氯化钠、山梨醇等聚合糖类（增加脂质分散面积）制成前体脂质体，遇水时脂质溶胀，载体溶解形成多层脂质体，其中载体的大小 　　直接影响脂质体的大小和均匀性。前体脂质体可预防脂质体之间相互聚集，且更适合包封脂溶性药物。 　　2、长循环脂质体: 经过PEG修饰，以增加脂质体的柔顺性和亲水性，通过单核-巨噬细胞系统吞噬，减少脂质体脂膜与血浆蛋白的相互作用，延长循环时间，称为长循环脂质体 　　(long-circulating liposome)。长循环脂质体有利于肝脾以外的组织或器官的靶向作用。同时，将抗体或配体结合在PEG的末端，既可保持长循环， 　　又可保持对靶体的识别。 　　3、免疫脂质体：脂质体表面联接抗体，对靶细胞进行识别，提高脂质体的靶向性。如在丝裂霉素（MMC）脂质体上结合抗胃癌细胞表面抗原的单克隆抗体3G 制成免疫脂质，在 　　体内该免疫脂质体对胃癌靶细胞的M85杀伤作用比游离MMC提高4倍。 　　4、热敏脂质体：利用在相变温度时，脂质体的类脂质双分子层膜从胶态过渡到液晶态，脂质膜的通透性增加，药物释放速度增大的原理制成热敏脂质体。例如将二棕榈酸磷脂 　　（DPPC）和二硬脂酸磷脂(DSPC)按一定比例混合，制成的3H甲氨喋呤热敏脂质体，再注入荷Lewis肺癌小鼠的尾静脉后，再用微波加热肿瘤部位至42℃，病灶部位 　　的放射性强度明显的高于非热敏脂质体对照组。 　　5、pH敏感性脂质体：由于肿瘤间质的pH比周围正常组织细胞低，选用对pH敏感性的类脂材料，如二棕榈酸磷脂或十七烷酸磷脂为膜材制备成载药脂质体。当脂质体进入肿瘤部 　　位时，由于pH的降低导致脂肪酸羧基脂质化成六方晶相的非相层结构，从而使膜融合，加速释药。 　　总之，脂质体作为药物载体是临床应用较早，发展最为成熟的一类新型靶向制剂。目前，美国FDA批准上市的脂质体产品有两性霉素B、阿霉素脂质体。批准进入临床试验的脂 　　质体有丁胺卡钠霉素。未来脂质体的研究主要集中在以下三个方面: 　　1、膜结构与载药性质之间的关系； 　　2、脂质体在体内的靶向特性； 　　3、在体外培养中将基因和其他物质导入细胞内有望成为基因药物载体。 是水不溶性的、极性磷脂质组成的双层碟状液晶分子，在水中可形成一个或数个同心的脂质双分子层。脂质体可包蔽水和水溶性药物，也可将脂溶性药物结合在双分子层的脂质部分。脂质体在结构上可分为单层脂质体（直径约25纳米）、多层脂质体（约100纳米）和大脂质体（约0.13微米左右）。其特点是可减少剂量、降低毒性，减轻变态反应，可延缓药物的释放，减少药物在体内消除程度，提高药物的治疗效果，改变药物在组织中的分布，增强药物的选择性作用。 脂质体也称微脂体，是极小的空心球体状，球壁由双层分子膜构成，此双层分子膜是由双层磷脂分子层构成，磷脂分子又由水溶性的球形头和脂溶性的条形分子尾两个部分组成，磷脂在水中分解时自然形成球体状结构，分解过程中，磷脂分子脂溶性条形分子尾，尾与尾相接，形成双层分子膜，水溶性的球形分子头在膜外，脂溶性的条形分子尾在膜内，这个结构使得脂质囊心和囊壁膜外部可吸收水溶性物质，囊壁双层分子膜内则可吸收脂熔性物质，因此，脂质体具有既可吸收和载送水溶性物质（如：维生素C ，人造防腐剂），又可吸收和载送脂溶性物质（如维生素E 和香精）的功能。脂质体的载送功能既有利又有弊，一方面，它可载送有益的成份（如维生素C，维生素E）；另一方面，也可载送有害于皮肤的成份（如会触发过敏反应的成份，香精和人造防腐剂）。

  脂质体的壁膜的组成成份：磷脂，也是皮肤细胞膜的主要组成成份，同时，皮肤细胞间隙组织成份---脂类成份，也含有大量的磷脂。脂质体是理想的皮肤磷脂补充成份，它可补充因皮肤细胞轻微受损，或因过度清洁皮肤而失去的细胞间隙组织的磷脂成份。磷脂和神经酰是细胞间隙组织的两个重要组成成份，可补充这两种成份的产品是最理想的护肤品。包曼博士?化妆品系列中的脂质体系列和修护面霜系列，均含有这两种成份。实践已证明，含有神经酰的脂质体是最佳的护肤品。我们认为，磷脂和神经酰是医学和科学美容不可少的天然活性成份：。因为脂质体中的磷脂结构与皮肤细胞膜的结构相同，使得脂质体具有非同寻常的亲肤性。在一般情况下，若采用类似皮肤的天然活性成份：来护理皮肤，皮肤几乎不可能有任何过敏反应。如果使用脂质体后，皮肤有过敏反应，是不合理使用脂质体的原因；脂质体不是引起过敏的根源，许多过敏源性成份（如人造芳香添加剂，和人造防腐剂）借助了脂质体的透皮功能，浸入皮肤内，因而引起了皮肤的过敏反应。