鬼笔环肽
取自 食品百科全书
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分子式C35H48N8O11S。无色,细针状结晶,系从毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中得到的有毒的环状七肽。与鹅膏蕈碱(amanitin)一起存在,毒性比鹅膏蕈碱弱,对小鼠的致死剂量是50微克,对人体也有很强的毒性,可引起流涎、呕吐、便血、发绀、痉挛、肌肉挛缩,以致死亡。它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡 | 分子式C35H48N8O11S。无色,细针状结晶,系从毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中得到的有毒的环状七肽。与鹅膏蕈碱(amanitin)一起存在,毒性比鹅膏蕈碱弱,对小鼠的致死剂量是50微克,对人体也有很强的毒性,可引起流涎、呕吐、便血、发绀、痉挛、肌肉挛缩,以致死亡。它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡 | ||
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鬼笔环肽(phalloidin)是从一种毒蘑菇Amanita phalloides中提取出来的毒素,FITC和Rhodamin等荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-acting结合,从而显示微丝骨架在细胞中的分布。 | 鬼笔环肽(phalloidin)是从一种毒蘑菇Amanita phalloides中提取出来的毒素,FITC和Rhodamin等荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-acting结合,从而显示微丝骨架在细胞中的分布。 | ||
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生理盐水PBS清洗细胞2次,每次10分钟; | 生理盐水PBS清洗细胞2次,每次10分钟; | ||
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加入5ug/ml的FITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间可以短一些,生理盐水PBS清洗细胞2次; | 加入5ug/ml的FITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间可以短一些,生理盐水PBS清洗细胞2次; |
当前修订版本
[编辑] 鬼笔环肽(phalloidin 鬼笔鹅膏素)是从一种毒性菇类中分离的剧毒生物碱
分子式C35H48N8O11S。无色,细针状结晶,系从毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)中得到的有毒的环状七肽。与鹅膏蕈碱(amanitin)一起存在,毒性比鹅膏蕈碱弱,对小鼠的致死剂量是50微克,对人体也有很强的毒性,可引起流涎、呕吐、便血、发绀、痉挛、肌肉挛缩,以致死亡。它同细胞松弛素的作用相反, 只与聚合的微丝结合, 而不与肌动蛋白单体分子结合。它同聚合的微丝结合后, 抑制了微丝的解体, 因而破坏了微丝的聚合和解聚的动态平衡
鬼笔环肽(phalloidin)是从一种毒蘑菇Amanita phalloides中提取出来的毒素,FITC和Rhodamin等荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-acting结合,从而显示微丝骨架在细胞中的分布。
鬼笔环肽的配制:0.1mg鬼笔环肽溶于1ml无水甲醇(也可用DMSO或无水乙醇溶解)配成贮存液,可在-20度避光的条件下长期保存,工作液的浓度为5ug/ml,由贮存液加生理盐水PBS稀释20倍即可。
染色程序:
生理盐水PBS清洗细胞2次,每次10分钟;
3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;
加入5ug/ml的FITC-鬼笔环肽室温染色30-60分钟,夏季时间可以短一些,生理盐水PBS清洗细胞2次;
DAPI或hoechst33258染细胞核10分钟,生理盐水PBS清洗细胞2次;
吸去多余水分,加荧光封片液(中性或偏碱性缓冲液加等量甘油),盖上盖玻片,荧光或共聚焦显微镜下观察。
注意事项:
鬼笔环肽的分子量小,很容易通过细胞,不需要对细胞进行冷丙酮和TRITON X-100处理。
药品价格昂贵,0.1mg的售价接近两千元,要节约使用。
毒性较大,戴上手套操作。