亮肽素
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[编辑] 亮肽素;leupeptin由玫瑰链霉菌Streptomyces roseus MB-26-AI产生的胰蛋白酶抑剂,它是许多蛋白酶抑制剂中的一种。
纯亮肽素熔点110~140℃,旋光度-56°(c=1.0,甲醇)。溶于水、甲醇、乙醇、丁醇、二甲亚砜,不溶于乙酸乙酯、丙酮、氯仿、己烷等,对Rydon-Smith、坂口呈附哇反应,对茚三酮、三氯化铁、蒽酮、莫利氏呈阳性反应。亮肽素可抑制胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、组织蛋酶B、血纤维蛋白溶酶、激肽释放酶等,它的抑制作用与底物呈竞争抑制。对血纤维蛋白溶酶的抑制IC50为8μg/ml,但不抑制糜蛋白酶。毒性低:小鼠LD50静脉注射118mg/kg,皮下注射1405mg/kg,口服给药1550mg/kg。口服亮肽素有消炎作用和抗血液凝固作用。
当细胞破碎的时候,蛋白水解酶就会被释放出来或被激活,使电泳结果复杂化,影响最终结果分析。为了避免这些情况的出现,建议在样品制备时尽可能在低温下进行。此外,许多蛋白酶在pH9以上就失活了,因此Tris碱,碳酸钠或碱性载体两性电解质往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述条件下仍然保持着活性,此时应当使用蛋白酶抑制剂。因此对于我们想要研究的蛋白来说,选择性和有效的抑制这些蛋白酶对于蛋白纯化路线设计来说显得尤为重要。